1966 yılında bünyesine katıldığı Şehir Tiyatroları'ndan emekli oluncaya kadar görev yapmıştır. Tiyatro oyunculuğunun yanı sıra televizyon ve sinema oyunculu seslendirme sanatçılığı da yapmaktadır.

2007 - 2008 sezonunda "Bana Bir Picasso Gerek" adlı oyunu ile misafir oyuncu olarak "Duru Tiyatro" ekibine katılmıştır. Buradaki performansı kendisine iki önemli ödülü birden kazandırmıştır. Kanal D ekranlarında yayınlanan "Paşa Gönlüm" dizisinde "Paşa Dede" rolünde oynayan Sezai Altekin, Tatar Ramazan dizisindeki Beyefendi performansıyla da büyük beğeni toplamıştır.

Usta oyuncunun beyazperdedeki son performansı ise Öteki Türkiye'de Bir Cumhurbaşkanı filmi olmuştur. Uzun bir süre boyunca "Hastane" adlı dizide rol almıştır.

Sezai Altekin, 31 Ocak 2025'te Muğla'nın Bodrum ilçesinde 79 yaşında hayatını kaybetmiştir.