Jesse Eisenberg ilk oyunculuk deneyimini 1999 yapımı "Get Real" dizisiyle yaşamıştır. Amerika'lı oyuncu "Sihirbazlar Çetesi" filmleri ile kariyerinde oldukça başarılı bir ivme yakaladı. Oyunculuğunun yanı sıra yazar, oyun yazarı ve komedyen olan Eisenberg New York sahnesinde üç oyunda yazarlık ve oyunculuk yaptı. 2009 yılında eleştirmenler tarafından beğenilen ve oyunculuğu hakkında övgüler aldığı komedi-dram filmi Adventureland ve korku-komedi filmi Zombieland'de yer aldı. 2010 yılında Facebook'un kurucusu Mark Zuckerberg'i canlandırdığı film ile BAFTA, Altın Küre ve Akademi Ödülleri'nde En İyi Erkek Oyuncu adaylığı kazandı. Eisenberg, kedileri çok sevmektedir. New York'ta bisiklet sürmeyi çok sevdiğini belirten oyuncu aynı zamanda obsesif kompulsif bozukluğu olduğunu açıklamıştır.