Jeffrey Dean Morgan "Grey's Anatomy" dizisinde "Denny Duquette" karakterini ve Supernatural dizisinde "John Winchester" karakterini oynadı. Ayrıca "Watchmen" filminde "The Comedian" rolüyle de tanındı. 2000 yılından itibaren ER, JAG, Walker, Texas Ranger, Angel, Tru Calling, CSI: Crime Scene Investigation, Sliders, The O.C., Monk gibi önemli dizilerde rol aldı. Bu dizilerle tanınan oyuncu asıl çıkışını The Walking Dead'in 6. sezonunda Rick ve grubunun karşısına çıkan en büyük düşman Negan'ı canlandırarak yaptı. Bu rolle dünya çapında tanınan başarılı oyuncu "Shameless" dizisinde ve "Batman v Superman: Dawn of Justice" filminde de yer aldı.